液相色譜儀是一種精度極高的檢測分析儀器，在環境、食品、生物、醫藥行業都有廣泛的應用，其操作人員對儀器分析過程掌握分寸高低會影響到分析結果的準確與否，山東譜析科學儀器有限公司技術人員簡單介紹液相色譜儀檢測分析樣品的幾個要點因素，以供參考。

流動相比例調整：我國藥品標準中沒有規定色譜柱的長度及填料的粒度，因此每次檢測一個新樣品時都須重新調整流動相，所以建議第一次檢驗樣品時配備適量的流動相即可，以免浪費。制備流動相的標準，主峰一般應調至保留時間為6～15分鐘為宜。弱電解質的流動相其重現性更不容易達到，應當注意充分平衡色譜柱。    

樣品配制：樣品溶液從待檢測樣品原料中提取出來之后，須經氮吹儀提純結晶之后配置成一定濃度的溶液，再使用溶劑過濾器進行過濾處理，方可進入儀器。除此之外，盛放溶液的溶劑避免使用塑料材質，塑料容器常含有高沸點的增塑劑，可能釋放到樣品液中造成污染，而且還會吸留某些藥物，引起分析誤差。某些堿性藥物會被玻璃容器表面吸附，影響樣品中藥物的定量回收，因此必要時應將玻璃容器進行硅烷化處理。

進樣量：檢測樣品的進樣量一般為10L，主要根據定量環的規格而定，目前多數HPLC系統采用定量環規格有10L、20L和50L，因此應注意進樣量是否一致。

記錄時間：樣品進入色譜柱后，第一次測定時，應先將空白溶劑、對照品溶液及供試品溶液各進一針，并盡量收集較長時間的圖譜（30分鐘以上），以便確定樣品中被分析組分峰的位置、分離度、理論板數及是否還有雜質峰在較長時間內才洗脫出來，確定是否會影響主峰的測定。

計算：檢測結果的計算主要根據色譜圖，色譜圖是定性定量分析的依據。色譜圖的橫軸表示保留時間，可以作為液相色譜儀器實現定性分析的依據；色譜峰上的極大值是定性分析的依據，而色譜峰所包羅的面積則取決于對應組分的含量，定量分析的依據。需要注意的是，由于有些對照品標示含量的方式與樣品標示量不同，有些是復合鹽、有些含水量不同、有些是鹽基不同或有些是采用有效部位標示，檢驗時須注意。

液相色譜儀檢測樣品注意事項如下：

①流動相濾過后，注意觀察有無肉眼能看到的微粒、纖維，至少過濾三次；

②柱在線時，增加流速應0.1ml/min的增量逐步進行，一般不超過1ml/min，反之亦然。否則會使柱床下塌，叉峰。柱不線時，要加快流速也需以每次0.5ml/min的速率遞增上去（或下來），勿急升（降），以免泵損壞；

③安裝柱時，請注意流向，接口處不要留有空隙；

④樣品液請注意濾過（注射液可不需濾過）后進樣，注意樣品溶劑的揮發性；

⑤測定完畢請用水沖柱1小時，甲醇30分鐘。如果第二天仍使用，可用水以低流速（0.1～0.3ml/min）沖洗過夜（注意水要夠量），不須沖洗甲醇。另外需要特別注意的是：對于含碳量高、封尾充分的柱，應先用含5～10%甲醇的水沖洗，再用甲醇沖洗。

⑥沖水的同時請用水充分沖洗液相色譜儀柱頭（如有自動清洗裝置系統，則應更換水）。