液質(zhì)聯(lián)用儀使用經(jīng)驗(yàn)與禁忌
2021-04-21 11:32:00來(lái)源：admin
色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，結(jié)合色譜及質(zhì)譜的技術(shù)，是目前分離和鑒定的最重要的分析方法之一。其中液相色譜-質(zhì)譜儀應(yīng)用更為廣泛，液相色譜質(zhì)譜儀有著分離能力強(qiáng)、分析范圍廣、定性分析結(jié)果準(zhǔn)確、分析時(shí)間快、自動(dòng)化程度高、檢測(cè)限低等諸多優(yōu)勢(shì)，在藥物、食品等多領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用
1、酸性物質(zhì)適合做負(fù)離子檢測(cè)，所以流動(dòng)相偏堿性較合適，促使其解離，堿性物質(zhì)適合做正離子檢測(cè)，流動(dòng)相中適當(dāng)?shù)募尤胨幔偈蛊湫纬烧x子，流動(dòng)相中適當(dāng)加一些醋酸鈉（或者醋酸銨），可形成加鈉的正離子或者加銨的正離子。
2、糖苷類的物質(zhì)在做FAB和esi（＋）時(shí)，[M+Na]峰往往比[M+H]峰要強(qiáng)，此為經(jīng)驗(yàn)，原因只是推測(cè)可能和天然產(chǎn)物的提取過(guò)程有關(guān)；鹽類化合物如鹽酸鹽、硫酸鹽在質(zhì)譜中酸的部分一般不會(huì)出現(xiàn)；二羧酸鹽（esi負(fù)離子模式）除了分子離子峰外，會(huì)出現(xiàn)連續(xù)掉44的兩個(gè)峰，為失去羧酸根的離子，這三個(gè)峰非常特征，但是會(huì)受錐孔電壓的影響，調(diào)低電壓譜圖會(huì)更漂亮。
3、胺類物質(zhì)做esi質(zhì)譜時(shí)要注意進(jìn)樣量要少，因?yàn)楹苋菀纂x子化，不易沖洗干凈，會(huì)影響后面樣品的測(cè)定。像三乙胺在液質(zhì)聯(lián)用時(shí)不能用于調(diào)節(jié)流動(dòng)相pH值。若不慎引入三乙胺，在正離子檢測(cè)時(shí)總會(huì)出現(xiàn)很強(qiáng)的102峰（三乙胺的[M+H]）.
4、質(zhì)譜用水一般用娃哈哈純凈水之類的就很好；質(zhì)譜用甲醇和乙腈，換用了很多品牌，發(fā)現(xiàn)Merck的還是稍微好一些；Finnigan用的氮?dú)獠灰欢ㄒ玫揭旱浚闷胀ǖ匿撈繗饩涂梢粤耍赡苓€省錢些；建議大家買一個(gè)好一點(diǎn)的手電筒和一個(gè)放大鏡，手電筒用來(lái)看源里面，放大鏡看你割的毛細(xì)管平整。
5、質(zhì)譜的基線其實(shí)跟液相的紫外檢測(cè)器和熒光檢測(cè)器一樣，基線高的原因不外乎內(nèi)部和外部的原因。
1）你選擇的流動(dòng)相在質(zhì)譜的響應(yīng)比較高，比如水相比較多的時(shí)候，噪音比較大些；還有如果鹽含量比較大的時(shí)候，噪音更大些。
2）檢測(cè)器的靈敏度越高的時(shí)候，噪音應(yīng)該越高。如果質(zhì)譜的污染比較嚴(yán)重時(shí)，基線肯定比較高。比如離子阱檢測(cè)器，用得久了，阱中的離子就會(huì)增多，一方面降低了質(zhì)譜的靈敏度，另一方面增加了基線噪音。
3）質(zhì)譜的基線很多時(shí)候還跟你選擇的離子寬度有關(guān)。比如你作選擇離子掃描的時(shí)候，基線就低些。你作選擇反應(yīng)掃描的時(shí)候，離子寬度不要選得太寬，太寬噪音就高些。
4）多級(jí)質(zhì)譜一般做二級(jí)或三級(jí)質(zhì)譜，基線噪音就低很多。
6、質(zhì)譜維護(hù)經(jīng)驗(yàn)交流：做樣前－檢查氮?dú)猓鲃?dòng)相，質(zhì)譜儀的真空度，毛細(xì)管溫度…
1）最好不用直接進(jìn)樣（容易污染離子源）；
2）做聯(lián)用時(shí)最好分流（a可以使用常規(guī)柱，b縮短分析時(shí)間，c 延長(zhǎng)質(zhì)量分析器壽命）；
3）蕞好使用在線切換閥，降前每個(gè)樣品的前后1－2分鐘的流動(dòng)相切入廢液（避免樣品中的鹽進(jìn)入質(zhì)譜，做Sequence時(shí)可以把平衡柱子的流動(dòng)相切入廢液）；
4）開(kāi)始聯(lián)用前，直接運(yùn)行質(zhì)譜數(shù)分鐘，可以先將溫度（毛細(xì)管溫度和離子源溫度（APCI））加熱到預(yù)設(shè)定值（如果是APCI源還可以避免將燒掉heater，太貴了，最好別燒）；
5）待機(jī)時(shí)將切換閥置于waste，避免剛開(kāi)液相時(shí)將流動(dòng)相打入離子源；
6）關(guān)機(jī)前毛細(xì)管的溫度先降下來(lái)，穩(wěn)定一段時(shí)間后再關(guān)閉電源，避免風(fēng)扇停止轉(zhuǎn)動(dòng)后毛細(xì)管外圍的熱量向里擴(kuò)散，容易引起內(nèi)部線路及電子元器件老化加速；
7）每天清理毛細(xì)管口外部，擦洗干凈，每次停機(jī)時(shí)注意清洗Skimmer，用無(wú)塵擦拭紙，kimberly那種；
8）如果用的是鋼瓶而且天天做樣的話，將兩個(gè)鋼瓶并聯(lián)，當(dāng)然，一月不做一次的話就算了；
9）做定量時(shí)注意離子源噴針的具體位置，否則標(biāo)準(zhǔn)曲線就不能用了；
10）不要不經(jīng)過(guò)柱子分離進(jìn)行定量分析，結(jié)果不可靠（競(jìng)爭(zhēng)性抑制目標(biāo)分子離子化）；
11）如果是負(fù)離子檢測(cè)的話，可以相流動(dòng)相中加入少量異丙醇；
12）不要使用不揮發(fā)性鹽，如果使用揮發(fā)性鹽，但濃度不要超過(guò)20mmol/l；
13）需要使用酸的情況下可以用甲酸，乙酸，三氟乙酸可以用，但能用甲酸或乙酸時(shí)就別用TFA；
7、理論上液質(zhì)聯(lián)用禁止使用任何不揮發(fā)性的緩沖鹽，如果需要盡量使用諸如乙酸氨等揮發(fā)性鹽，濃度不要超過(guò)20mmol/l.
對(duì)于不揮發(fā)性的緩沖鹽，如果你的儀器有吹掃捕集的話也可使用，但一定要小心。萬(wàn)不得已也不要用，首先有不揮發(fā)鹽是得不到好的離子流的，其次鹽留在質(zhì)譜中很難除掉，除非停機(jī)清洗，不然一直會(huì)影響其他樣品的分析。
可以找質(zhì)譜友好的條件來(lái)做液質(zhì)聯(lián)機(jī)，例如色譜條件為20mM磷酸鹽的水/乙腈流動(dòng)相，做液質(zhì)聯(lián)機(jī)的時(shí)候就可以用醋酸銨代替，然后用醋酸調(diào)節(jié)pH值與磷酸鹽的一致即可。
除了難揮發(fā)的鹽，三乙胺、表面活性劑、還有高濃度（>0.5%）的TFA，都對(duì)質(zhì)譜不好，液質(zhì)聯(lián)用的流動(dòng)相中應(yīng)該避免。
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