色譜分離技術(shù)的概念以及氣相色譜法、液相色譜法的分類
色譜分離是利用混合物中各組分在兩相中分配系數(shù)不同,當(dāng)流動(dòng)相推動(dòng)樣品中的組分通過(guò)固定相時(shí),在兩相中進(jìn)行的連續(xù)多次反復(fù)的分配,從而形成差速移動(dòng),達(dá)到分離目的的方法。
色譜分離技術(shù)是基于不同物質(zhì)在由固定相和流動(dòng)相構(gòu)成的體系中具有不同的分配系數(shù),在采用流動(dòng)相洗脫過(guò)程中呈現(xiàn)不同保留時(shí)間,從而實(shí)現(xiàn)分離。傳統(tǒng)色譜分離技術(shù)采用固定的色譜塔進(jìn)行,先進(jìn)入一定量物料,然后采用洗脫劑不斷洗脫,在同一出口在不同時(shí)間段就可接到不同的產(chǎn)品組分,此過(guò)程費(fèi)時(shí)費(fèi)力。經(jīng)過(guò)分析并加以改進(jìn),把固定相的樹脂做成可以連續(xù)流動(dòng)的系統(tǒng),利用物質(zhì)與固定相的相對(duì)運(yùn)動(dòng)速度不同實(shí)現(xiàn)分離。把固定相比成一個(gè)傳送帶,分別比成快慢不同的兩組份,只要使固定相加上一個(gè)與洗脫方向相反的驅(qū)動(dòng)力,使傳送帶運(yùn)動(dòng)速度處于速度中間,跑的快的比固定相快。從前頭得到,跑得慢的被傳送帶帶到后面得到。
色譜法簡(jiǎn)單分為氣相色譜法、液相色譜法、超臨界流體色譜法。根據(jù)氣相和液相制備的不同,再分為填充柱色譜法、毛細(xì)管色譜法、經(jīng)典液相色譜柱法、高效液相色譜法、薄層色譜法、紫色普法、毛細(xì)管電泳法。無(wú)論怎么分類,都有共同的特點(diǎn):凡是色譜分離都具有固定相和流動(dòng)相;固定相是不動(dòng)的,流動(dòng)相相對(duì)于固定相做相對(duì)運(yùn)動(dòng);被分離的組分與流動(dòng)相和固定相都有不同的作用力。這種作用力有吸附力、溶解力、離子交換能力等。
根據(jù)分離原理還可將色譜法分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、凝膠色譜、親和色譜、電泳色譜、氣相色譜等。利用物質(zhì)吸附能力不同進(jìn)行分離的稱為吸附色譜,常用的吸附劑有硅膠、氧化鋁、聚酰胺、活性炭、大孔吸附樹脂等。利用物質(zhì)在兩相不互溶的溶劑中的分配比不同進(jìn)行分離的稱為分配色譜,常用的支持劑有硅膠、硅藻土、纖維粉等。液滴逆流色譜和高速逆流色譜則是在分配色譜與逆流分溶相結(jié)合的基礎(chǔ)上發(fā)展而成的一種新技術(shù)。利用物質(zhì)解離程度不同進(jìn)行分離的稱為離子交換色譜,常用的離子交換樹脂有強(qiáng)酸型(磺酸型)、強(qiáng)堿型(季胺型)、弱酸型(羧酸型)、弱堿型(三級(jí)胺型)等。利用物質(zhì)分子大小不同進(jìn)行分離的稱為凝膠色譜(亦稱分子篩或排阻色譜),常用的支持劑有葡聚糖凝膠、羥丙基葡聚糖凝膠等。利用電流通過(guò)時(shí),離子趨電性不同進(jìn)行分離的稱為電泳色譜,常用的有紙電泳、瓊脂電泳、凝膠電泳等。
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